Il sistema di blotting semisecco DYCP-40C viene utilizzato insieme all'alimentatore per elettroforesi per trasferire le proteine nei gel di poliacrilammide sulla membrana come membrana di nitrocellulosa, membrana di nylon e membrana di PVDF. Il blotting semi-secco viene eseguito con elettrodi a piastre di grafite in una configurazione orizzontale, inserendo un gel e una membrana tra fogli di carta da filtro imbevuta di tampone che funzionano come serbatoio di ioni. Durante il trasferimento elettroforetico, le molecole cariche negativamente migrano fuori dal gel e si spostano verso l'elettrodo positivo, dove si depositano sulla membrana. Gli elettrodi a piastra, separati solo dal gel e dalla pila di carta da filtro, forniscono un'elevata intensità di campo (V/cm) attraverso il gel, effettuando trasferimenti rapidi e molto efficienti. La superficie di trasferimento della cella elettroforetica più piccola DYCP – 40C è 150 × 150 (mm), adatta al trasferimento di gel standard, compresi quelli della cella elettroforetica DYCZ-24DN e DYCZ-24EN.
Impariamo di più sul funzionamento di questo apparato trans blot semi-secco.
Materiali, strumenti per il funzionamento del DYCP-40C
Alimentatore per elettroforesi DYY-6C, apparecchio trans blot semisecco DYCP-40C, soluzione tampone e contenitori per soluzione tampone. ecc.
Passaggi operativi
1. Mettere il gel con le lastre di vetro nella soluzione tampone di trasferimento
2. Misurare la dimensione del gel
3.Preparare 3 pezzi di carta da filtro in base alla dimensione del gel e la dimensione della carta da filtro dovrebbe essere leggermente più grande della dimensione del gel; Qui utilizziamo la carta da filtro Whatman;
4.Mettere lentamente 3 pezzi di carta da filtro nella soluzione tampone e lasciare che la carta da filtro si immerga completamente nel tampone ed evitare la formazione di bolle d'aria;
5.Preparare e tagliare la membrana di nitrocellulosa in base alle dimensioni del gel e della carta da filtro; la dimensione della membrana di nitrocellulosa dovrebbe essere maggiore della dimensione del gel e della carta da filtro;
6.Mettere la membrana di nitrocellulosa nella soluzione tampone;
7.Estrarre i 3 pezzi di carta da filtro e eliminare la soluzione tampone extra finché non cade più alcuna soluzione tampone dalla membrana; quindi posizionare la carta da filtro sul fondo del DYCP-40C;
8.Prendere il gel dalle lastre di vetro, pulire delicatamente il gel di impilamento e inserire il gel nella soluzione tampone;
9.Posizionare il gel sulla carta da filtro, iniziare da un'estremità del gel per evitare la formazione di bolle d'aria;
10.Utilizzare uno strumento adeguato per eliminare le bolle d'aria tra il gel e la carta da filtro.
11.Coprire la membrana di nitrocellulosa sul gel, con il lato ruvido rivolto verso il gel. E poi usa uno strumento adeguato per eliminare le bolle d'aria tra la membrana e il gel. Metti 3 pezzi di carta da filtro sulla membrana. È comunque necessario utilizzare uno strumento adeguato per eliminare le bolle d'aria tra la carta da filtro e la membrana.
12.Coprire il coperchio e impostare i parametri di funzionamento dell'elettroforesi, la corrente costante 80 mA;
13.L'elettroforesi è terminata. Otteniamo il risultato come segue;
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd è specializzata nella produzione di prodotti per elettroforesi da oltre 50 anni. Siamo un'azienda certificata ISO9001 e ISO13485 e siamo specializzati nella produzione di serbatoi per elettroforesi, alimentatori, transilluminatore UV e sistema di documentazione e analisi del gel. Nel frattempo forniamo ai nostri clienti il servizio OEM e il servizio ODM.
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Orario di pubblicazione: 04-apr-2023